La exposición de los organismos a condiciones de temperatura diferentes a las ideales causan la alteración de las funciones celulares y la expresión de genes encargados de alivianar el daño celular. Esta maquinaria de respuesta a estrés por calor se encuentra conservada entre bacterias, plantas y animales e involucra la expresión de las llamadas HSPs, entre otras.
C.elegans se ha vuelto un modelo muy útil para el estudio de la respuesta fisiológica y celular al estrés térmico, así como su correlación con patologías y envejecimiento. Utilizando el sistema WMicrotracker ARENA es posible realizar un seguimiento en tiempo real de la dinámica de respuesta comportamental al estrés y medir el efecto de nuevas moléculas pequeñas, genes o compuestos naturales. A continuación presentamos un ejemplo de medición.
Cinética de cambios de comportamiento ante estrés térmico
En este experimento podemos observar el efecto dinámico observado en el comportamiento al someter a una población de gusanos a estrés por temperatura. Tal como esta reportado, se observa una respuesta diferente en larvas L3 y adultos de 3días de edad.
Metodología:
(1) Obtener poblaciones sincronizadas de gusanos en placas NGM+OP50 crecidos a temperatura de 20°C. (2) Recolectar a los gusanos de las placas, utilizando solución tampón. (3) Contar el número de gusanos en un volumen de 10 ul y ajustar el volumen para obtener una concentración de [50 gusanos / 20ul]. (4) Transferir 20 μl de la solución de gusanos a cada pocillo de una microplaca de 6 pocillos conteniendo NGM sin bacteria. (5) Registrar la actividad de la placa con gusanos usando Wmicrotracker ARENA, programando la temperatura de la siguiente manera: 30m a 22°C, 90m a 37°C y 360m a 22°C. (6) Generar el reporte de datos y graficar utilizando MSExcel.