Los parásitos helmintos continúan representando problemas en la medicina humana y veterinaria, así como en la agricultura. La resistencia a la administración de medicamentos ha impulsado la búsqueda de nuevas drogas. Los metabolitos con actividad antihelmíntica provenientes de plantas medicinales podrían ser buenos candidatos para la obtención de nuevos fármacos. Sin embargo, muchos de los compuestos activos provenientes de plantas no han sido identificados. El objetivo de este trabajo fue identificar plantas medicinales con actividad antihelmíntica para el posterior aislamiento de los compuestos.
Materiales Y Métodos
Se seleccionaron seis plantas medicinales autóctonas de Kenia en función de su uso etnofarmacológico para el tratamiento de diferentes enfermedades infecciosas. Las muestras se obtuvieron de hojas de W. ugandensis, Albizia gummifera, Zanthoxylum chalybeum, Zanthxylum gilleti, Turrea holstii, Toddalia asiatica. Se redisolvió 1 ml de extracto en agua (para el extracto acuoso) o DMSO para los extractos de etanol, hexano y acetona a una concentración de 40 mg/ml. El ensayo antihelmíntico se llevó a cabo en una microplaca de 96 pocillos. Se recolectaron gusanos en estadio jóvenes adultos en solución M9 y se preparó una suspensión de 3000 larvas/ml. Luego, se añadieron 15 μL de esta suspensión (45 larvas) a cada pocillo de una microplaca de 96 pocillos conteniendo 184 μL de cultivo de E. coli OP50 (DO 600 = 0.5). Posteriormente, se añadió a cada pocillo, el extracto a testear (200 μg/ml) en un volumen de 1 μl; Se usó DMSO como control del diluyente y levamisol como control positivo. Después de agitar, la microplaca de 96 pocillos se colocó en el sistema de registro WMicrotracker y se incubó durante 16 horas a 20ºC. La actividad de los gusanos se registró cada 30 minutos y se calculó el porcentaje del movimiento promedio durante 16 horas de registro del tratamiento. El mismo método se usó para probar la actividad de compuestos activos en un panel de cepas mutantes resistentes a fármacos y cepas mutantes de canales TRP.
Resultados
Las 24 muestras preparadas por extracción a pequeña escala de las seis plantas medicinales en cuatro disolventes diferentes se analizaron para determinar la actividad antihelmíntica a la misma concentración (200 μg/ml). Los resultados mostraron que los extractos de etanol y acetona de W. ugandensis tienen una actividad antihelmíntica bastante fuerte en el ensayo de WMicrotracker, con el extracto de etanol que muestra la actividad más potente entre los cuatro extractos. Además, los extractos de etanol de Z. chalybeum y Z. gilleti mostraron baja actividad. Por lo tanto, el extracto de etanol de W. ugandensis se seleccionó para posterior aislamiento a gran escala de extracción y bioensayo guiado de compuestos activos.
Int J Parasitol. 2018 Jul 18. pii: S0020-7519(18)30151-6. doi: 10.1016/j.ijpara.2017.11.009.
Liu M, Kipanga P, Mai AH, Dhondt I, Braeckman BP, De Borggraeve W, Luyten W.