La acumulación de agregados de proteínas es una de las principales características del trastorno neurodegenerativo progresivo, como la enfermedad de Parkinson y la enfermedad de Alzheimer. Los nematodos transgénicos de Caenorhabditis elegans expresando la proteína sináptica humana α-sinucleína en el músculo de la pared del cuerpo muestran cuerpos de inclusión de proteína agregada, afectando vías genéticas similares a las de los humanos. Sin embargo, no se sabe cómo los efectos de la expresión de α-sinucleína en C.elegans difiere en distintos aislados genéticos. Aquí, se comparan los patrones de expresión génica y se observan los cambios fenotípicos de la expresión del transgen α-sinucleína en cinco diferentes aislados genéticos de C. elegans.
Materiales y Métodos
A partir de la expresión del transgén pkIs2386 [unc-54p :: α-sinucleína :: YFP + unc-119 (+)] de NL5901 (transgen en la cepa N2), se obtuvieron otros transgénicos en las líneas aisladas JU1511, JU1926, JU1931 y JU1941. Las larvas L1 sincronizadas se colocaron en placas de NGM con E.coli a 20ºC. Cuando los gusanos alcanzaron el estadio L4, se transfirieron 10 gusanos por pocillo a una microplaca de 96 pocillos, en un volumen de 50 μl de solución M9. Se realizaron tres réplicas biológicas, con 3 a 5 pocillos por genotipo. La actividad se registró en un período de 30 minutos utilizando un WMicrotracker.
Resultado
El ensayo de actividad locomotora en medio líquido se muestra en la figura 3c. Los datos indican que N2 y NL5901 muestran tasas de movimiento similares y que la expresión de líneas que expresan α-sinucleína muestran una actividad reducida en comparación con su aislado salvaje correspondiente. Por lo tanto, estos datos indican que la presencia de un transgen de α-sinucleína produce un impacto específico del genotipo, probablemente una consecuencia directa de la expresión de α-sinucleína en los músculos de la pared del cuerpo.
BMC Genomics. 2019 Mar 20;20(1):232. doi: 10.1186/s12864-019-5597-1
Wang YA, Snoek BL, Sterken MG, Riksen JAG, Stastna JJ, Kammenga JE, Harvey SC.