La mayoría de los experimentos se basan en el análisis de poblaciones. Sin embargo, algunos investigadores están interesados en el estudio de un solo individuo. En WMicrotracker es posible realizar experimentos de hasta 1 gusano. Aquí te contamos algunos tips para realizar este tipo de ensayos.
En primer lugar, tendrá que hacer que el individuo o los pocos individuos pasen tanto tiempo como sea posible sobre el haz de luz. Para ello deberemos reducir el volumen de trabajo al mínimo y concentrar a la muestra en el espacio donde se encuentran los haces mediante el uso de placas con fondo en forma de U. La forma del fondo de este tipo de placa hace que la población de gusanos se concentre por gravedad sobre el medio del fondo donde se encuentran los haces de luz. De este modo se logra una mayor sensibilidad.
Las señales de movimiento en placa en “u” saturan más rápidamente que en las placas de fondo plano. En la siguiente figura, se grafican los resultados de una población de entre 10 y 30 gusanos comparando la actividad detectada en los distintos formatos de placas.
En la primera figura, se observa el resultado del ensayo en placa de 96 pocillos fondo en “U” versus placa de fondo “plano”. Nótese que la sensibilidad de detección es mayor en la placa fondo en “U”. En la segunda figura, se analiza el error estándar relativo al valor de actividad locomotora. Nótese que para poblaciones pequeñas, las placas de fondo en “U” presentan menor variabilidad entre pocillos.
Otra recomendación es diseñar el ensayo utilizando volúmenes pequeños (ejemplo, 40 ul en lugar de 100 ul). Sin embargo, se debe tener en cuenta que el proceso de evaporación del medio se convertirá en un problema. En lugar de utilizar tapa de plástico, podría utilizarse un film adherente permeable al intercambio de oxígeno.
Referencias a experimentos con gusanos únicos pueden encontrarse en:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0165027006005760