La administración de anestésicos locales (AL) es una de las técnicas de control del dolor más efectivas para la analgesia post-operatoria. Sin embargo, los agentes anestésicos difunden fácilmente en el sitio de la inyección, limitando el tiempo de la anestesia. Una estrategia para prolongar el tiempo de la analgesia podría basarse en el empleo de vehículos nanoestructurados para encapsular AL (por ejemplo, liposomas). Dibucaína (DBC) es un amino-amida AL de alta potencia, el cual se ha utilizado para testear su encapsulación en liposomas de gradiente iónico preformados. Ensayos de toxicidad realizados in vitro (células 3T3 en cultivo) e in vivo (pez cebra) revelaron que los liposomas de gradiente iónico podían reducir la cito / cardiotoxicidad DBC, así como los cambios morfológicos en las larvas de pez cebra.
Materiales Y Métodos
Se estudiaron los cambios comportamentales del pez cebra para evaluar el efecto toxicológico del aumento de la concentración de DBC en el sistema WMicrotracker. Las larvas se registraron durante 15 minutos a las 4 horas, 24 horas y 48 horas post-tratamiento (hpt) con dibucaína (libre DBC o en formulación liposómica LUVDBCAS). La actividad motora se calculó como la suma de los eventos de actividad durante 15 minutos. Los experimentos se realizaron tres veces, con ocho larvas por grupo (n = 24).
Resultados
La actividad natatoria del pez cebra se registró para evaluar los efectos conductuales de DBC. La Figura 6A muestra que dosis de DBC bajas (0,5 a 2 μM), DBC libre y LUVDBCAS no modificaron significativamente el movimiento espontáneo de las larvas (expresado como un porcentaje, relativo al control: larvas no tratadas). Las larvas tratadas con 4 μM DBC presentaron hipoactividad a 4 hpt, pero a 24 hpt y 48 hpt mostraron un comportamiento hiperactivo. Este cambio de actividad motora no fue evidente para LUVDBCAS a los 24 y 48 hpt. El tratamiento con 0.5-4 μM DBC no causó anestesia profunda, ya que las larvas pudieron reaccionar al estímulo mecánico (datos no mostrados). Por lo tanto, cualquier cambio en el comportamiento causado por DBC con las dosis de 0.5-4 μM puede estar relacionado con la neurotoxicidad de la DBC, y LUVDBCAS parece atenuarlo. El modelo de pez cebra fue especialmente útil para evaluar las toxicidades del anestésico y los ensayos realizados con la formulación de liposomas basada en gradiente iónico resultaron convenientes para la liberación sostenida de dibucaína.
Figure 6: A) Percentage of spontaneous movement of zebrafish larvae treated with dibucaine (free or
encapsulated in LUVDBCAS) for 4, 24 and 48 (n = 24). Statistical analysis was performed by One-way
ANOVA/Dunnett with significance of *p<0.05; **p<0.01, ***p< 0.001 and ****p<0.0001, compared to the control (non-treated larvae).
J Pharm Sci. 2018 May 23. pii: S0022-3549(18)30314-9. doi: 10.1016/j.xphs.2018.05.010.
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