La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo común que involucra la agregación de α-sinucleína (α-syn), estrés oxidativo, desregulación de la homeostasis de metales redox y neurotoxicidad. El presente estudio tiene como objetivo investigar por primera vez el efecto del tirosol (TYR), un fenol simple presente en el aceite de oliva extra virgen (AOVE), en la agregación de α-syn en un modelo de EP en C.elegans y evaluar su potencial para prevenir toxicidad, neurodegeneración y estrés oxidativo.
Materiales y Métodos
Para el ensayo de parálisis en cultivo líquido, se utilizaron las cepas de C.elegans N2 y NL5901. La cepa NL5901 sobre expresa α-syn:YFP en células musculares de la pared del cuerpo del gusano y también exhibe defectos de movilidad dependientes de la edad asociados con la agregación de α-syn:YFP. Para este ensayo, se obtuvieron poblaciones sincronizadas de gusanos mediante la técnica de hipoclorito. Se cultivaron gusanos en medio sólido hasta el día 1 del estadio adulto. FUDR a concentración 0.12mM fue incorporado en el estadio L4. Adultos día 1 de la cepa N2 o NL5901, se transfirieron a pocillos de una placa de 96 pocillos fondo plano con medio S suplementado con OP50 (OD = 0,5) a 20ºC. Se agregó TYR 1 mM y se evaluó la locomoción bajo condiciones de control y tratamiento durante 90 minutos después de 3, 7, 9 y 11 días usando WMicrotracker. Se utilizaron un total de 180 gusanos por condición experimental.
Resultados
Como se muestra en la Fig.3, la cepa NL5901 exhibe una disminución prematura y progresiva de la actividad locomotora en comparación con la cepa salvaje N2 (Fig. 3A). Esta disminución se hace más evidente en el adulto día 7 en nematodos control y NL5901 tratados con TYR. Sin embargo, en el adulto día 9, los nematodos tratados con 1mM TYR exhibieron una mejoría de actividad en comparación con los controles no tratados (conteos/30 minutos: control 7.7±1.81 vs. TYR 1mM 20.9±5.62; test-t *p=0.0364) (Fig. 3B). Para el día 11 de adultos, ambos grupos mostraron un nivel similar de actividad locomotora, cercano al 100% de parálisis.
Garcia-Moreno JC, Porta de la Riva M, Martínez-Lara E, Siles E, Cañuelo A.